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作为制备靶向治疗药物的一种方法，克隆细胞系的发展已经越来越受到重视和投入，然而面对单细胞克隆日益增长的实验需求， 目前常用的实现方法都不尽如人意。 通过有限稀释和显微镜操作，或利用像流式细胞仪这类的自动化设备进行细胞的筛选和分离，数量少且非常耗费时间和精力，缺少克隆性的依据，细胞存活率低，不能有效处理小批量样本，且具有较高的交叉污染风险。这些设备的采购和运营成本较高，但却缺乏证实克隆来自单细胞的证明。

德国cytena公司开发的单细胞打印机（CloneSelect SCP）则有效解决了这一问题。这款产物技术将细胞检测传感器和按需滴定印刷技术相结合。过程类似于传统的喷墨打印机。通过在细胞轻轻的沉积在孔板之前筛选出单个细胞和细胞形态，确保细胞的活力；使用无菌的，一次性的打印墨盒避免了交叉污染；在沉积的过程中，提供单细胞的图像，为用户提供了他们的细胞系是来自于单克隆的证据，符合FDA对单抗的生产需证实来自于单个细胞的要求，大大提升药品的开发进程。

颁测迟别苍补开发的克隆筛选单细胞打印机是台式的自动化的实验室设备，由于软件采用直观，友好的界面设计，所以无需特别的经验，实验室的任何成员都可以进行操作 ，设备的操作设置简单快速，分离一块含单细胞的96孔板只需几分钟时间。

克隆筛选单细胞打印机工作原理：

SCP技术基于顶端的透明微型分配芯片，用于从细胞悬浮中按需生成微滴。分配器芯片是一个包含微流体结构的硅玻璃化合物，被称为剂量室的背面有一个硅膜（图b），它被一个压电板制动器所挤压偏转，这种挤压偏转导致腔体内的液体位移，液滴从喷嘴喷出来。根据流体的物理性质和压电控制参数，可以使用直径为40μm的喷嘴，将液滴体积控制在100 pL至250 pL的范围内。

芯片连接到储存器，可以装载体积为5至100&尘耻;尝的细胞悬浮液。通过简单的手动上样法将细胞悬浮液装载到容器中来，芯片通过毛细管力自我填充，因此可以在样品加载后直接打印。

技术亮点：

单细胞的证据可追溯性

在肠补谤迟谤颈诲驳别分离细胞前后的过程中，会连续拍取多张细胞图片，证实克隆来自于单个细胞。这些图片会根据孔板的位置进行命名，并存储在硬盘中，以便追踪。

单细胞打印效率高，且适用于多个细胞系

CloneSelect SCP打印效率普遍高于96%,有的细胞甚至达到100。分离快速，一个96孔板只需2-3min，且每个孔都有多张图片证实为单细胞，该技术已经应用于在多种细胞的单细胞分离如CHO, HEK,Hela，L929，U2OS等。

细胞无损伤，单细胞存活率高

细胞无需标记染色，没有激光损伤，没有电压的影响，直接采用 catridge进行分离，所以细胞没有任何损伤，分离后的细胞存活率高，克隆恢复率高。

应用领域

• 单克隆筛选

• 单细胞基因组学

• 单细胞笔颁搁

• 稀有细胞的分离

应用案例

克隆细胞系开发在单抗领域是一个至关重要的环节。现有的细胞系开发流程存在很多弊端如缺乏单克隆证据，单细胞分离效率低下，单细胞存活率低等。

SCP技术不仅能快速有效的分离单细胞，还能提供单克隆来源的证据，且保证细胞高的存活率以及0风险的交叉污染。单细胞打印机SCP支持96孔和384孔板,已经成功应用于一系列典型的细胞系如CHO, U2OS，HEK293, L929，Hela细胞等。

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